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計數(shù)儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 和 細(xì)胞計數(shù)和活率檢測標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一、 啟動Cedex XS 系統(tǒng)
1. 打開計數(shù)儀：按下計數(shù)儀上的ON/OFF按鈕 2. 打開Cedex XS 控制軟件： ① 打開配套電腦，進(jìn)入Windows操作系統(tǒng) ② 雙擊桌面上的Cedex XS 圖標(biāo) 3. 調(diào)節(jié)白平衡：安裝Cedex XS系統(tǒng)或移動系統(tǒng)后必須調(diào)節(jié)白平衡 ② 點擊Cedex XS 控制中心中的HWM鍵 ③ 點擊WHITE BALANCE鍵進(jìn)行調(diào)節(jié)，結(jié)果將自動保存 ④ 調(diào)節(jié)完畢后關(guān)閉對話框 二、 細(xì)胞計數(shù)與活性測定 1. 樣品制備 ① 用培養(yǎng)基或PBS將樣品稀釋至細(xì)胞數(shù)不高于5×106/ml ② 使用0.2%臺盼藍(lán)染色（一般為10μl ④ 用移液槍取細(xì)胞懸液加入樣品板，每槽10μl；可以一次測定八槽，也可測定單槽。 2. 進(jìn)樣：樣品板有八個槽，一次可測定四個樣品槽。 ① 拉出樣品板支架； ② 加有樣品方向朝里，將樣品板放上支架； ③ 將支架推入計數(shù)儀，有少許卡扣感表示已就位：樣品槽位置指示燈表示樣品測定進(jìn)程。 三、 軟件設(shè)置： 1. 打開測定界面：在Cedex XS 控制中心點擊MEASURE鍵，進(jìn)入測定界面； 2. 設(shè)置樣品參數(shù)： ① 在樣品參數(shù)欄輸入樣品名（Reactor ID），可在下拉欄選擇或手動輸入，zui多可輸入21個字符； ② 輸入樣品編號（Sample ID），zui多21個字符；若樣品名已存在，軟件將自動延續(xù)樣品編號，也可手動重新輸入編號； ③ 軟件將自動記錄日期和時間，表明樣品測定的實際時間； ④ 點擊MI×鍵，出現(xiàn)進(jìn)樣體積對話框； ⑤ 輸入?yún)?shù)：樣品量（Sample Volume）、臺盼藍(lán)用量（Dye Volume）、稀釋劑用量（Diluent Volume）； ⑥ 系統(tǒng)將自動計算稀釋比例等，可以手動輸入注釋（Comments）。 3. 設(shè)置測定與分析參數(shù)： ① 在分析參數(shù)欄選擇需要的精度水平（Precision）：精度水平表示單次測定樣品數(shù) ② 選擇細(xì)胞類型，默認(rèn)的細(xì)胞類型有：標(biāo)準(zhǔn)大小細(xì)胞直徑約12-14μm；可識別對象；小細(xì)胞直徑約8μm； ③ 系統(tǒng)自動添加系統(tǒng)名和測定時間。 四、 開始測定 ① 點擊START MEASUREMENT鍵； ② 測定多個樣品時，在彈出對話框后將樣品板支架推進(jìn)一格，點擊確定自動開始測定程序； ③ 重復(fù)上一步驟測定其他樣品； ④ 若測定樣品多于四個，可將支架抽出后樣品板調(diào)轉(zhuǎn)方向重新插入進(jìn)行上述測定程序； ⑤ 全部測定結(jié)束后關(guān)閉對話框。 五、 計數(shù)結(jié)果 1. 在測定界面獲得結(jié)果 測定程序完成后，結(jié)果在測定界面的數(shù)據(jù)欄（Result Data）顯示，數(shù)據(jù)欄有兩個表格：*個表格顯示總細(xì)胞數(shù)，第二個表格顯示單次測定中每個樣品室的測定結(jié)果。 兩個表中分別列出以下參數(shù)： Viable Cell Conc.: 活細(xì)胞濃度 [×105/mL] Total Cell Conc.: 總細(xì)胞濃度 [×105/mL] Viability (%): 細(xì)胞總數(shù)中活細(xì)胞的百分比 Total Cell Count: 測定總細(xì)胞數(shù) Avg Compactness: 活細(xì)胞與理想狀態(tài)細(xì)胞形狀的平均變異程度（1表示細(xì)胞形狀均一） Avg Diameter: 測定活細(xì)胞平均直徑 [μm] Aggregate Rate (%):成團(tuán)細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的比值 Dead Cell Conc.: 死細(xì)胞濃度 [×105/mL] Viable Cell Count: 測定活細(xì)胞數(shù) Dead Cell Count: 測定死細(xì)胞數(shù) Total Object Count: 全部測定數(shù) Total Object Conc.: 總濃度 [×105/mL] Avg Object Diameter: 測定總?cè)后w平均直徑 [μm] Avg Object Compactness: 所有測定群體與理想狀態(tài)細(xì)胞形狀的平均變異程度。 在單個樣品結(jié)果表中，會有三項列在表頭： Image No.: 圖像編號l Valid: 表示圖像質(zhì)量是否能夠達(dá)到分析要求l Excluded: 復(fù)選框以排除或包括該樣品在總結(jié)果表中的顯示l 2. 在柱形圖中看結(jié)果：此結(jié)果不包括已經(jīng)由上述復(fù)選框選擇排除的計數(shù)結(jié)果 ① 在測定界面點擊HISTOGRAMS鍵，打開柱形圖對話框； ② 可選擇以下項目： 成團(tuán)細(xì)胞柱形圖 細(xì)胞直徑柱形圖 細(xì)胞形狀均一度柱形圖 總?cè)褐睆街螆D 六、 查看圖像 單副圖像：在測定界面的右側(cè)顯示的是選定的單個樣品測定結(jié)果所對應(yīng)的圖像； 多幅圖像：在圖像顯示區(qū)點擊VIEW IMAGES鍵出現(xiàn)圖像列表，可顯示單次測定的多個樣品。 1. 在圖像框查看圖像 圖像框提供放大圖像，系統(tǒng)自動分析活細(xì)胞與死細(xì)胞，并用綠色圈和紅色圈分別標(biāo)出，還可以使用下列功能： 雙擊圖像可打開大圖，調(diào)節(jié)對比、亮度和焦距；l 顯示或隱藏細(xì)胞的圈標(biāo)記 瀏覽前后樣品的圖像 按住左鍵圈定可將選定圖像放大或自定義尺寸，右鍵點擊圖像進(jìn)行保存或復(fù)制 七 若圖像亮度不均衡，則需調(diào)節(jié)白平衡 ① 把載物支架拉出； ② 點擊Cedex XS 控制中心中的HWM鍵 ③ 點擊WHITE BALANCE鍵進(jìn)行調(diào)節(jié)，結(jié)果將自動保存 ④ 調(diào)節(jié)完畢后關(guān)閉對話框 八 1. 點擊Cedex XS 控制中心中的LIST鍵，或在Measurements菜單中選擇Measurement List 查找結(jié)果 瀏覽總體的測定數(shù)據(jù) 刪除結(jié)果 打印報告 結(jié)果輸出保存為文件 開始新測定 查看測定過程 重新測定 2. 查找結(jié)果可以通過以下方式：選定后點擊FIND鍵 樣品處理時間 測定時間 樣品名 樣品編號 系統(tǒng)名 存檔數(shù)據(jù)/全部數(shù)據(jù) 數(shù)據(jù)組 細(xì)胞類型 九 順序為：Cedex XS 控制中心（軟件）→配套電腦→計數(shù)儀 ，按鈕亮起藍(lán)色光表示儀器已打開； ； ，進(jìn)入Cedex XS 控制中心 ； 。 ① 把樣品板支架拉出； ，打開硬件管理對話框 ； ； 。 ； 、1：1）：臺盼藍(lán)對血清蛋白親和力更強(qiáng)，若大量血清蛋白導(dǎo)致圖像背景過暗，可以將樣品離心，用無蛋白培養(yǎng)基或生理鹽水懸浮細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)； ③ 將細(xì)胞懸液充分混勻；，zui多8個；；l；l。l、 系統(tǒng)優(yōu)化：調(diào)節(jié)白平衡，影響圖像亮度的調(diào)節(jié)。，打開硬件管理對話框
；
；
、 結(jié)果列表
，可選擇以下功能：
、 關(guān)機(jī)
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