分光光度計的工作原理
發(fā)布時間: 2017-09-08 點擊次數(shù): 2952次
分光光度計,就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器
。分光光度計是上海馳唐電子引進根據(jù)電磁輻射原理
,不同的物質(zhì)具有不同的選擇吸收
,也即具有不同的吸收光譜
。
分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸
,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量
。儀器主要由光源、單色器
、樣品室
、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成
。
工作原理
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置
,從而產(chǎn)生特定波長的光源
,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收
,計算樣品的吸光值
,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比
。物質(zhì)對光的選擇性吸收波長
,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液
,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量
。在可見光區(qū)
,除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定
,故又稱比色分析
。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器
,故測定時應(yīng)用標(biāo)準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。分光光度計
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